YlyA和RNA聚合酶的反应性鉴定

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目的:用亲和层析法鉴定YlyA与RNA聚合酶(RNAP)的结合性能。方法:将YlyA分别上样于以Affigel 15为亲和介质制备的空白柱、牛血清白蛋白(BSA)柱和RNAP柱;以GreA和绿色荧光蛋白(GFP)为阳性和阴性对照蛋白分别上样于同一RNAP柱,洗涤和洗脱缓冲液(pH均为7.9)的盐离子浓度分别为30mmol/L和400mmol/L;用免疫印迹法对洗涤和洗脱流出液中的YlyA进行检测。结果:在空白柱和BSA柱的洗脱收集液中,没有检测到YlyA,大量的YlyA出现在了洗涤收集液中;而在RNAP柱
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