观察丙氨酸-乙醛酸转氨酶2类似物1(AGXT2L1)对肝癌细胞增殖、凋亡和周期的调控作用。
方法实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肝癌细胞株97H、HCCLM3和正常肝细胞株LO2中AGXT2L1的表达水平；设计并构建AGXT2L1的靶向siRNA，将AGXT2L1-siRNA转染97H和HCCLM3细胞株构建AGXT2L1靶向敲低组和阴性对照组，通过RT-qPCR验证敲低效果；采用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测各组细胞在0、12、24、48、72、96 h的增殖能力；采用流式细胞周期实验检测各组细胞在G1、S、G2期的分布情况；采用原位缺口末端标记法(TUNEL)实验检测各组细胞的凋亡率。
结果AGXT2L1在肝癌97H和HCCLM3细胞中相对表达高于正常肝细胞LO2(1 350.04±91.36、1 710.64±92.34，t97H＝25.574，P<0.01；tHCCLM3＝32.068，P<0.01)。转染AGXT2L1-siRNA后，对比对照组及空白组，肝癌97H和HCCLM3细胞内AGXT2L1相对表达量明显降低(0.19±0.04比1.10±0.04，t97H＝－28.722，P<0.01；0.20±0.01比0.93±0.09，tHCCLM3＝－13.887，P<0.01)。CCK-8实验结果显示，敲低AGXT2L1后，97H和HCCLM3细胞的增殖率明显下降(0.71±0.01比0.95±0.12，t97H＝－31.243，P<0.01；0.67±0.13比0.87±0.17，tHCCLM3＝－17.083，P<0.01)，差异有统计学意义。细胞周期实验结果显示，干扰AGXT2L1表达后，S期细胞比例低于对照组[(13.45±1.20)%比(18.73±0.28)%，t97H＝－7.451，P<0.01；(15.26±0.52)%比(20.45±1.08)%，tHCCLM3＝－7.483，P<0.01]；G2期细胞比例低于对照组[(16.90±0.54)%比(19.99±0.54)%，t97H＝－6.992，P<0.01；(16.23±0.28)%比(23.36±0.39)%，tHCCLM3＝－25.720，P<0.01]，抑制细胞从G1期向S期转变，抑制肝癌细胞增殖。细胞凋亡实验显示：干扰AGXT2L1表达后，97H和HCCLM3细胞凋亡率明显升高[(13.06±1.86)%比(1.06±0.75)%，t97H＝14.673，P<0.01；(14.41±2.21)%比(0.80±0.32)%，tHCCLM3＝14.947，P<0.01]，差异有统计学意义。
结论敲低AGXT2L1的表达抑制肝癌97H和HCCLM3细胞株增殖，促进细胞凋亡。