【摘 要】
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目的建立稳定胰岛素抵抗肝癌(HepG2/IR)细胞模型,探讨模型细胞内质网应激伴侣蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达及其对顺铂的敏感性的关系。方法采用0.5、1.0μmol/L胰岛素诱
【机 构】
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兰州大学第二医院检验科,兰州大学基础医学院医学实验中心,
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目的建立稳定胰岛素抵抗肝癌(HepG2/IR)细胞模型,探讨模型细胞内质网应激伴侣蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达及其对顺铂的敏感性的关系。方法采用0.5、1.0μmol/L胰岛素诱导HepG2细胞发生胰岛素抵抗,日立7600全自动生化仪检测培养上清液中的葡萄糖水平并计算葡萄糖消耗量;MTT法测定顺铂对细胞的增殖抑制作用,AnnexinⅤ/PI双标记检测细胞的凋亡率;实时荧光定量PCR、流式细胞术和Western-Blot法分别测定细胞胰岛素受体(InsR)及GRP78的表达水平。结果 HepG2/IR细胞葡萄糖消耗量降低、InsR表达显著受抑,对顺铂的敏感性降低,48h和72h的IC50为未作诱导处理HepG2细胞的165.9%和158.8%,差异有统计学意义(P<0.05),凋亡率降低50.29%。HepG2/IR细胞GRP78mRNA和蛋白的表达量分别为HepG2细胞的2.12倍和2.27倍。结论肝癌HepG2细胞经胰岛素诱导发生胰岛素抵抗后对顺铂的耐药性增强,其机制与内质网应激伴侣蛋白GRP78的表达增高有关。
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