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目的
分析浙江省丽水地区产NDM菌株的耐药表型及基因结构特征,为临床抗感染治疗和防控提供实验依据。
方法收集浙江省丽水市中心医院2012年1月至2016年12月临床分离的所有无重复亚胺培南耐药性肠杆科细菌,以梅里埃Vitek 2 Compact系统鉴定菌种并以PCR筛选blaNDM基因阳性菌株,采用KB法和GN13卡检测菌株药敏性,利用复制起始子分析法鉴定质粒类型,通过转化或接合试验纯化质粒并采用PCR和全基因组测序分析blaNDM周围基因结构。
结果共分离碳青霉烯耐药肠杆科细菌(CRE)菌株102株,其中blaNDM阳性15株,阳性检出率为14.7%,主要为大肠埃希菌和阴沟肠杆菌。各菌株对β-内酰胺类抗菌药物的耐药率为100%,对氨曲南、复方磺胺甲噁唑、妥布霉素、庆大霉素的耐药率均>80%;对喹诺酮类药物的耐药率>50%。15株产NDM菌株中,12株改良Hodge试验阳性,另有2株阴沟肠杆菌和1株大肠埃希菌呈阴性结果。其中blaNDM-1型11株,blaNDM-5型4株。检到IncX3、IncFIIγ和IncA/C等多种质粒类型,且4例blaNDM-5基因均位于IncX3质粒。发现4种blaNDM周围基因结构,其中8例blaNDM-1基因位于ISAb125-hyp-blaNDM-1-bleMBL-TrpF-DsbC-IS26,而blaNDM-5均位于IS3000-IS5-blaNDM-5-bleMBL-TrpF-DsbC-IS26结构,且前者在国内尚属首次报道。
结论丽水地区NDM菌株呈低水平流行,并对磷霉素和多黏菌素敏感性较高;blaNDM基因可能有多种来源,但IncX3型质粒仍是介导该基因转移的主要原因,并发现新型blaNDM-1基因结构。