CRISPR/Cas9系统靶向敲除多溴蛋白1基因对肝癌细胞功能的影响

来源 :临床内科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：huangxiaojie33

【摘要】

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目的探讨应用规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(Cas9)系统靶向敲除多溴蛋白1(PBRM1)基因对肝癌细胞功能的影响。方法应用CRISPR/Cas9系统靶向敲除Huh7细胞

【作者】

：

宋金鸽焦宇辰

【机构】

：

北京协和医学院

【出处】

：

临床内科杂志

【发表日期】

：

2020年4期

【关键词】

：

CRISPR/Cas9 基因敲除多溴蛋白1 Huh7细胞系 CRISPR/Cas9Gene knockoutPolybromo1Huh7 cell line

【基金项目】

：

中国科学院医学创新基金资助项目(2019-I2M-1-003)

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目的探讨应用规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(Cas9)系统靶向敲除多溴蛋白1(PBRM1)基因对肝癌细胞功能的影响。方法应用CRISPR/Cas9系统靶向敲除Huh7细胞的PBRM1基因。采用Sanger测序和蛋白质印迹法(Western blot)检测基因敲除情况。基于转录本测序(RNA-seq)结果,对Huh7敲除(KO)细胞株与Huh7野生(WT)细胞系差异表达基因进行功能富集。采用流式细胞术分析细胞周期的改变。通过CCK-8法和克隆形成实验研究细胞增殖情况。采用不

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