CALA在毕赤酵母中的表达、纯化及酶学特性研究

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将南极假丝酵母脂肪酶A(cala)基因克隆至组成型表达载体pGAPZctA中,电激转入X-33,获得高效表达的CALA酵母工程菌株。发酵液上清经超滤浓缩、硫酸铵沉淀和阴离子交换层析等步骤,获得纯化的重组CALA,其比酶活达384.90U/mg。该酶最适温度为70℃,最适pH值为8.0。经50℃保温2h,仍含有60%水解酶活力;在pH7.0和8.0溶液中比较稳定。经DMSO处理1h,仍保持90%的活性;非离子型表面活性剂能提高CALA的酶活,金属离子在不同程度上抑制CALA的酶活。
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