基于Tet-On 3G的IFITM3诱导表达MDCK细胞系的建立及功能分析

来源 :高等学校化学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zzjkan
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利用Tet-On 3G系统构建了含人IFITM3基因的真核表达质粒p TRE3G-IFITM3,并将其与调控质粒p LVX-Tet3G共转染犬肾细胞(MDCK),转染后48 h用G418和嘌呤霉素进行筛选,用多西环素(Dox)对获得的细胞系进行诱导表达鉴定,并进行Dox敏感性分析、IFITM3+细胞百分数及定位分析.用含萤光素酶(Luciferase)报告基因的禽流感病毒H5/H7蛋白或VSV G蛋白包裹的假型慢病毒颗粒进行感染实验,检测萤光素酶活性.结果表明,筛选获得了携带人IFITM3的MDCK诱导表
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