【摘 要】
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目的 探讨松树皮提取物碧萝芷对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、凋亡和转移的影响及可能机制。方法 分别用30、60和90 mg/L的碧萝芷和RPMI 1640培养基（对照组）处理乳腺癌MDA-MB-231细胞，采用MTT法检测碧萝芷对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖抑制作用；克隆形成实验检测对MDA-MB-231细胞体外生长能力的影响；流式细胞仪检测细胞凋亡率；Transwell小室法分别检测
【机 构】
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中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所第一研究室
【基金项目】
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辽宁省科学技术厅2021“兴辽英才计划”（XLYC2002062）；
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目的 探讨松树皮提取物碧萝芷对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、凋亡和转移的影响及可能机制。方法 分别用30、60和90 mg/L的碧萝芷和RPMI 1640培养基（对照组）处理乳腺癌MDA-MB-231细胞，采用MTT法检测碧萝芷对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖抑制作用；克隆形成实验检测对MDA-MB-231细胞体外生长能力的影响；流式细胞仪检测细胞凋亡率；Transwell小室法分别检测各浓度碧萝芷对乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移和侵袭能力的影响；蛋白质印迹法分别检测碧萝芷处理后，乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-9、Caspase-3、PARP以及基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9的表达；明胶酶谱法检测MMP-2和MMP-9的活性。结果 MTT结果显示，与对照组相比，碧萝芷呈剂量依赖及时间依赖性抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖，差异有统计学意义，F浓度=178.335,P浓度＜0.001;F时间=3.476,P时间=0.035;二因素间交互作用：F时间×浓度=3.162,P时间×浓度=0.007,为协同作用。克隆形成实验结果显示，对照组及30、60、90 mg/L碧萝芷组克隆形成率分别为（20.09±1.96）%、（14.34±2.05）%、（12.90±1.37）%和（9.81±1.27）%,差异有统计学意义，F=57.902,P＜0.001。流式细胞仪检测结果显示，对照组及30、60、90 mg/L碧萝芷组的细胞凋亡率分别为（3.58±0.26）%、（5.75±0.40）%、（9.60±0.20）%和（19.71±0.38）%,差异有统计学意义，F=4 507.561,P＜0.001。Transwell小室结果显示，对照组及30、60、90 mg/L碧萝芷组的迁移细胞数目分别为41±3、36±4、22±5和9±2,差异有统计学意义，F=131.882,P＜0.001;侵袭转移的细胞数目分别为30±4、27±3、17±2和10±2,差异有统计学意义，F=89.964,P＜0.001。蛋白质印迹法结果显示，碧萝芷可上调Bax（F=973.558,P＜0.001）、Caspase-9（F=679.196,P＜0.001）、Caspase-3（F=912.678,P＜0.001）和PARP（F=70.155,P＜0.001）蛋白表达，下调Bcl-2（F=216.980,P＜0.001）蛋白表达。同时，各组MDA-MB-231细胞中的MMP-2（F=160.844,P＜0.001）及MMP-9（F=94.135,P＜0.001）蛋白表达水平降低；MMP-2（F=1 363.577,P＜0.001）和MMP-9（F=1 017.977,P＜0.001）活性降低。结论 碧萝芷可通过促进乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的方式抑制其生长，且能抑制细胞的迁移和转移。
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