【摘 要】
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为了了解ERK信号通道对正常大鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)增殖与凋亡的调控.通过对正常大鼠ASMCs原代培养,4~7代用于实验,以ERK激动剂表皮生长因子(
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科,原单位为广西医科大学第一附属医院,华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科,华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科,华中科技大学同济医学院附属同济医院
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为了了解ERK信号通道对正常大鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)增殖与凋亡的调控.通过对正常大鼠ASMCs原代培养,4~7代用于实验,以ERK激动剂表皮生长因子(EGF)和抑制剂PD98059干预ASMCs生长,采用RT-PCR和免疫荧光染色观察ASMCs上ERKmRNA和蛋白的表达,MTT法、3H-TdR掺入法检测ASMC增殖,Hoechst染色和Annexin-ⅤFITCPI双染色法检测细胞凋亡,Western免疫印迹检测ERK1/2、磷酸化ERK1/2和procaspase-3蛋白的表达.结果发现ASMCs上存在ERKmRNA和蛋白的表达,与空白对照组比较,PD98059干预后ASMCs的A490值和细胞DNA合成量均减少(P<0·05),细胞凋亡指数、早期凋亡细胞百分率均增高(P<0·05),ERK1/2、磷酸化ERK1/2表达和ERK活化率均降低,procaspase-3蛋白的表达增高.EGF干预后ASMCs的A490值和细胞DNA合成量均增高(P<0·05),细胞凋亡指数、早期凋亡细胞百分率均下降(P<0·05),ERK1/2、磷酸化ERK1/2表达和ERK活化率均增高,procaspase-3蛋白的表达降低.P+E组无明显差异(P>0·05).ERK信号通道参与大鼠ASMCs增殖和凋亡的调控,ERK对大鼠ASMCs凋亡的调控与procaspase-3蛋白有关,这一发现将有助于对哮喘ASMCs异常增殖调控机制的深入研究.
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