【摘 要】
：
目的 观察15-脂氧合酶-1(15-LOX-1)基因转移对氧诱导小鼠视网膜新生血管的抑制作用.方法 7日龄C57BL/6J小鼠96只,随机分为正常对照组、氧诱导视网膜病变(OIR)模型组、基因治
【机 构】
：
湖北省襄阳市中心医院,武汉大学人民医院眼科
论文部分内容阅读
目的 观察15-脂氧合酶-1(15-LOX-1)基因转移对氧诱导小鼠视网膜新生血管的抑制作用.方法 7日龄C57BL/6J小鼠96只,随机分为正常对照组、氧诱导视网膜病变(OIR)模型组、基因治疗组和空白载体组.将小鼠与哺乳母鼠共同置于氧浓度为(75±2)％的氧箱内饲养5d后转移至正常环境中饲养5d,建立OIR模型.小鼠出生后第12天基因治疗组玻璃体腔注射携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和小鼠15-LOX-1基因的重组腺病毒(Ad-15-LOX-1-EGFP)载体1μl；空白载体组注射等量携带EGFP的重组腺病毒(Ad-EGFP)载体.注射后第2天行视网膜铺片荧光显微镜观察EGFP的表达.注射后第5天行免疫荧光染色法、实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白免疫印迹法检测15-LOX-1基因转染视网膜的表达；视网膜铺片观察视网膜血管变化,测量视网膜无灌注区和新生血管的相对面积；石蜡切片苏木精-伊红染色并计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核.结果 Ad-15-LOX-1-EGFP注射第2天,视网膜铺片上观察到EGFP的表达.免疫荧光染色结果显示,15-LOX-1基因转染视网膜主要表达在外丛状层、内核层和神经节细胞层.基因治疗组15-LOX-1蛋白和mRNA表达水平明显高于OIR模型组和空白载体组,差异有统计学意义(t蛋白表达水平=22.74、24.13,tmRNA表达水平=12.51、13.40;P＜0.01)；基因治疗组视网膜无灌注区和新生血管面积较OIR模型组和空白载体组显著减小,差异有统计学意义(t血管区面积=16.22、14.31,t新生血管面积=9.97、9.07;P＜0.01)；基因治疗组中突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核与OIR模型组和空白载体组比较明显减少,差异有统计学意义(t=14.25、11.62,P＜0.01).结论 15-LOX-1基因转移不仅可以减少氧诱导小鼠视网膜无灌注区面积,并且对视网膜新生血管有显著的抑制作用.
其他文献
随着对血管内皮生长因子(VEGF)的深入研究和抗VEGF药物的研发,新生血管性老年性黄斑变性治疗领域有了突破性进展.抗VEGF药物治疗新生血管性老年性黄斑变性的主要途径是玻璃体
患者男,59岁.右眼视力下降23 d到我院眼科就诊.患者曾于2012年2月6日因无明显诱因突发右眼视力下降2h就诊外院,行荧光素眼底血管造影(FFA)检查,结果显示右眼早期可见视网膜动
患者男,38岁.因右眼视物模糊1个月余来我院就诊.平素体健,无疾病史.全身检查未见明显异常.眼部检查:右眼视力0.4,不能矫正;左眼视力1.0.裂隙灯显微镜检查结果显示,双眼外眼及
随着经济的不断发展和我国综合国力的不断提升,给我国煤矿企业注入了新的发展活力。中层管理人员作为煤矿企业的重要力量,其素质水平的高低直接关系着煤矿企业的整体走向和发
眼底病激光治疗技术的不断发展和提高是与激光科学技术的不断发展和提高、激光波长尤其是红光和近红外光的完善、稳定发展和提高有关；此外,还与激光波长以及光斑大小、曝光时
近年来伴随着我国改革开放的逐步深入以及现代化建设进程的加快,我国的煤矿企业如何在当前经济高速发展的新形势下,发挥好工会的作用成为了煤矿企业亟待解决的问题。在构建和
目的 了解国内外息肉样脉络膜血管病变(PCV)研究文献的分布规律以及PCV的研究趋势.方法 以美国科学情报研究所的网络数据库Web of Science(WOS)数据库、中国知网的中国学术期
目的 观察蓝光照射对人视网膜色素上皮(RPE)细胞L-型钙通道mRNA表达的影响.方法 体外培养的第4代人RPE细胞按随机数字表法分为无光照组、光照组、光照+硝苯地平组和光照+(-)B
在当前中国,随着社会主义市场经济的不断发展,许多的企业将重点投入到对经济效益的追逐中,而忽视了企业思想内涵工作的重要性,还有很多企业错误地认为,思想工作只是走形式,对
目的 观察光照后人视网膜色素上皮(RPE)细胞趋化因子受体3(CCR3)配体嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)-1、eotaxin-2、eotaxin-3的表达.方法 体外培养人RPE细胞,取第5～10代生长