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将6-14代的人胚胎成纤维细胞以0.5,0.62,0.89和1.12℃/min的降温速率用胚胎冷冻法进行超低温冷冻保存,解冻活率达到0.83-0.93。并证明平衡时间以2-2.5h为宜,诱发结晶步骤可以省略,其饲养层寿命长达25-28d,还可反复冷冻,长期应用于胚胎干细胞的分离与克隆研究。