流式细胞仪分离工作犬XY精子的研究

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[目的]探索适用于犬性别控制的流式细胞仪分离精子的方法.[方法]采集昆明犬和德国牧羊犬的精液,采用不同浓度(6、8、10、12 μl/ml)的Hoechst 33342对精液进行染色,探讨不同浓度的荧光染料Hoechst 33342及公犬个体对精子分离效果的影响.[结果]当Hoechst 33342浓度分别为6、8、10 μl/ml时,X和Y精子的DNA差异不能被分辨成双峰,只有当Hoechst 33342为12 μl/ml时,X/Y双峰能有效并稳定地分离.不同公犬的鲜精死精率与X/Y精子分离速度呈明显负相关性,而分离准确率则与鲜精死精率无明显相关性.[结论]当Hoechst 33342浓度为12 μl/ml时,流式细胞仪能将警犬X、Y精子成功分离.选择适宜的种公犬对提高精子的分离效率和分离精液的品质都有重要意义.
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