贴壁培养细胞台盼蓝拒染试验的方法学探讨

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本工作旨在探讨贴壁培养细胞台盼蓝拒染试验的方法,为其合理应用提出建议。用正常培养及NaN3作致死处理的人视网膜色素上皮细胞株-19,进行原位贴壁细胞和培养体系上悬液中细胞的台盼蓝拒染实验,并比较其原位法与计数板法所测活细胞率。与计数板法相似,随染液浓度增高或染色时间延长,原位台盼蓝拒染实验的活细胞率检测值逐渐增加。培养体系上悬液中脱落细胞的存活率显著低于贴壁的细胞,NaN3处理使脱落细胞增加。因此,对于贴壁牢固的培养细胞,原位台盼蓝染色是检测活细胞率的实用方法。根据细胞从培养表面上消化下来的难易程度和脱落到培养上悬液中的数目多少,可选用原位染色法或/和计数板法台盼蓝拒染试验,从而检测贴壁培养细胞的总存活率。
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