ARG1基因对人胚肾细胞293砷染毒前后增殖及凋亡的影响

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目的:观察ARG1基因对不同浓度的亚砷酸钠(NaAsO2)染毒后的293细胞的增殖及凋亡的影响,并讨论ARG1的抗砷性。方法:将ARG1表达质粒pcDNA3.1-ARG1及空载体对照质粒pcDNA3.1分别经阳离子脂质体(Lipofectamine2000)介导转染293细胞后,荧光共聚焦显微镜观察细胞转染率;将实验组pcDNA3.1-ARG1-293细胞、空白对照组pcDNA3.1-293细胞及阴性对照组293细胞用不同浓度的NaAsO2浓度染毒48h后,使用MTT法检测ARG1基因对砷染毒后293细胞的增殖的影响;将实验组、空白对照组及阴性对照组按不同浓度NaAsO2染毒,加入AnnexinVFITC/PI凋亡试剂,采用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况。结果:(1)荧光共聚焦显微镜观察转染结果显示转染率可达75-85%;(2)NaAsO2在1-8μmol/L时其对实验组细胞增值的抑制率明显低于对照组,而在浓度>8μmol/L时则没有明显差异;(3)实验组细胞在NaAsO2浓度<8μmol/L其凋亡率明显低于对照组。结论:ARG1能够降低NaAsO2对293细胞增值的抑制率,减轻其对293细胞的促凋亡作用,主要是在低浓度时发挥作用。
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