【摘 要】
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目的观察过表达人滋养层细胞表面抗原-2(TROP-2)基因对人前列腺癌细胞的迁移和侵袭及上皮-间充质转化的影响。方法将TROP-2基因克隆到真核表达载体pcDNA3. 1,构建TROP-2基因过表达真核表达质粒。PC-3细胞分为3组:空白对照组、空载对照组和TROP-2过表达组。转染PC-3细胞后,采用Western blot法观察TROP-2蛋白表达,采用Transwell方法检测癌细胞迁移和侵
【机 构】
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212002镇江,江苏大学附属人民医院肿瘤研究所,212002镇江,江苏大学附属人民医院肿瘤研究所,212002镇江,江苏大学附属人民医院肿瘤研究所,212002镇江,江苏大学附属人民医院肿瘤研究所,
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目的观察过表达人滋养层细胞表面抗原-2(TROP-2)基因对人前列腺癌细胞的迁移和侵袭及上皮-间充质转化的影响。
方法将TROP-2基因克隆到真核表达载体pcDNA3. 1,构建TROP-2基因过表达真核表达质粒。PC-3细胞分为3组:空白对照组、空载对照组和TROP-2过表达组。转染PC-3细胞后,采用Western blot法观察TROP-2蛋白表达,采用Transwell方法检测癌细胞迁移和侵袭能力,采用Western blot法检测癌细胞E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白表达。
结果成功构建TROP-2基因真核表达质粒。与空白对照组和空载对照组比较,TROP-2过表达组TROP-2蛋白明显升高。Transwell迁移实验结果显示,空白对照组、空载对照组和TROP-2过表达迁移细胞数分别为(132. 6±2. 2)、(130. 8±1. 8)和(189. 6±2. 6)个。与空白对照组比较,差异有统计学意义(P< 0. 01);Transwell侵袭试验显示,空白对照组、空载对照组和TROP-2过表达迁移细胞数分别为(118. 16±1. 96)、(117. 52±1. 85)和(166. 38±1. 65)个。与空白对照组比较,差异有统计学意义(P< 0. 01)。Western blot结果显示,与空白对照组比较,TROP-2过表达细胞组E-钙黏蛋白表达降低,而N-钙黏蛋白表达增高。
结论TROP-2过表达可促进人前列腺癌细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与促进上皮-间充质转化有关。
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