【摘 要】
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目的:构建PML-RARα融合基因与人干扰素γ(IFN-γ)基因真核双表达载体,为利用DNA疫苗治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)奠定基础.方法:利用PCR技术从APL细胞株(NB4细胞)的RNA中
【机 构】
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广东省惠东县人民医院内六科,广东 惠东,516300
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目的:构建PML-RARα融合基因与人干扰素γ(IFN-γ)基因真核双表达载体,为利用DNA疫苗治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)奠定基础.方法:利用PCR技术从APL细胞株(NB4细胞)的RNA中扩增出PML-RARα的部分基因片段,从含有IFN-γ基因的质粒中通过PCR扩增出IFN-γ基因,利用基因克隆技术将PML-RARα和IFN-γ基因片段克隆到Pires质粒中,然后利用双酶切和序列分析方法验证所构建真核双表达载体的正确性.结果:双酶切结果证明重组载体中含有相应大小的PML-RARα基因片段及IFN-γ基因片段,且序列分析证明重组载体中插入片段的碱基序列均完全正确.结论:构建了含有PML-RARα基因及IFN-γ基因的真核双表达载体,为下一步验证蛋白的表达及DNA疫苗的研制奠定基础.
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