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目的:鉴于TGFB在肿瘤发展过程中的负性免疲调节作用,使T淋巴细胞对TGFB失去敏感性可以恢复其对肿瘤的杀伤活性,拟用含有TβRⅡDNglytk质粒的慢病毒来感染T淋巴细胞使其对TGFB失去敏感性后发挥抗肿瘤效应,因此我们首先构建含有TβRⅡDNglytk的人真核表达的慢病毒质粒载体plenti6/v5-D-TOPO-TβRⅡDNglytk。方法:从质粒上将TβRⅡDN及HSV-tk克隆下来,重组PCR技术将其构建为融合蛋白TβRⅡDNglytk,琼脂糖凝胶电泳后切胶回收纯化:再利用TOPO克隆技术将其连