【摘 要】
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目的 建立一种肠道病毒通用型微滴式数字PCR(ddPCR)的定量检测方法,以实现肠道病毒的量化检测.方法 利用肠道病毒标准品对ddPCR反应中的探针浓度、退火温度进行优化,并确定dd
【机 构】
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广东省疾病预防控制中心,广东广州,511430;广东省疾病预防控制中心广东省公共卫生研究院
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目的 建立一种肠道病毒通用型微滴式数字PCR(ddPCR)的定量检测方法,以实现肠道病毒的量化检测.方法 利用肠道病毒标准品对ddPCR反应中的探针浓度、退火温度进行优化,并确定ddPCR的检测范围.利用已优化好的反应条件对28份临床样本进行病毒载量检测.结果 本研究确定ddPCR的最佳探针浓度为0.4 μmol/L,退火温度为51.0℃,核酸检测范围为3.02～3.59×106 copies/μL,检出限为3.02 copies/μL.ddPCR方法线性相关系数为0.993 8,呈良好的线性关系.结论 本研究建立基于ddPCR肠道通用型的定量方法,可有效地对临床样本中不同血清型的肠道病毒临床样本进行拷贝数定量分析,为临床研究病毒载量的测定提供一种技术.
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