【摘 要】
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本研究建立了一种基于吖啶酯-磁微球的自动化学发光免疫法（Chemiluminescence Immunoassay,CLIA）检测牛奶中的赭曲霉毒素A（OchratoxinA,OTA）。采用磁微球偶联二抗，吖啶酯标记OTA-BSA偶联物，优化了磁微球浓度、OTA抗体浓度、吖啶酯标记物浓度、抗体和标记物稀释液、反应时间、样品预处理条件等各种CLIA方法的试验条件。结果表明，CLIA方法对OTA的检出
【机 构】
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华南农业大学食品学院广东食品质量安全重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（32061160473）； 广东省普通高校重点研究项目（2019KJDXM002）资助；
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本研究建立了一种基于吖啶酯-磁微球的自动化学发光免疫法（Chemiluminescence Immunoassay,CLIA）检测牛奶中的赭曲霉毒素A（OchratoxinA,OTA）。采用磁微球偶联二抗，吖啶酯标记OTA-BSA偶联物，优化了磁微球浓度、OTA抗体浓度、吖啶酯标记物浓度、抗体和标记物稀释液、反应时间、样品预处理条件等各种CLIA方法的试验条件。结果表明，CLIA方法对OTA的检出限为6.38 ng/kg，半抑制浓度(IC50)为31.40 ng/kg，线性范围为11.23～99.20 ng/kg，批内和批间的变异系数＜8%；测定牛奶样品中的OTA时，检出限为25.52 ng/kg,IC50为125.60 ng/kg，线性范围为44.92～396.80 ng/kg，添加回收率为95.08%～105.83%；对赭曲霉毒素B、赭曲霉毒素C的交叉反应率为6.52%和24.57%，对其他真菌毒素均无明显的交叉反应；对牛奶样品的检测结果与高效液相色谱-串联质谱法一致；且CLIA方法的试剂能在2～8℃稳定保存9个月以上。本研究建立的CLIA方法，具有灵敏、准确、快速和操作便捷等特点，检测时长仅30 min，尤其适用于大规模牛奶样品中OTA残留的快速筛查。
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