【摘 要】
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[摘 要]目的 将人的酷氨酸羟化酶(hTH)和胶质细胞源性神经营养因子(hGDNF)基因共同转染SH-SY5Y细胞，筛选可同时高效稳定表达TH和GDNF的工程细胞，探讨其在帕金森病(PD)基因治疗中的作用。方法 将hTH和hGDNF cDNA插入表达载体pcDNA3.0和pcDNA3.1，构建重组真核表达载体pcDNA3.1／hGDNF和pcDNA3.0／hTH，然后转染至SH-SY5Y细胞
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[摘 要]目的 将人的酷氨酸羟化酶(hTH)和胶质细胞源性神经营养因子(hGDNF)基因共同转染SH-SY5Y细胞，筛选可同时高效稳定表达TH和GDNF的工程细胞，探讨其在帕金森病(PD)基因治疗中的作用。方法 将hTH和hGDNF cDNA插入表达载体pcDNA3.0和pcDNA3.1，构建重组真核表达载体pcDNA3.1／hGDNF和pcDNA3.0／hTH，然后转染至SH-SY5Y细胞系，利用RT-PCR鉴定和筛选出高效稳定表达阳性克隆。将此工程细胞与大鼠原代多巴胺能神经元共培养，免疫细胞化学检测观察多巴脂能神经无的数目和生长状态。结果 （1）双转基因工程细胞可防止多巴脂能神经元退变死亡，与对照组比较，神经元数目最多提高了2.8倍(p＜0.01)；（2）工程细胞可抵抗N-甲基-苯基吡啶(MPP+)对多巴脂能神经元的毒性损伤作用，与对照组比较，细胞数目增加了83.6％（为7.6倍，p＜0.01）。结论 首次成功建立了可同时高效稳定表达人TH和GDNF双基因的工程细胞，对多巴脂能神经元有防、治兼顾的保护作用。
[关键词]帕金森病；多巴胺；酪氨酸单氧化酶；神经生长因子；遗传
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