【摘 要】
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目的 探讨褪黑素对氧化应激条件下的大鼠髓核间充质干细胞（NPMSCs）的影响及调节机制。方法 使用差速贴壁法获取大鼠NPMSCs。显微镜下观察细胞状态，鉴定第三代细胞三系分化潜能和细胞表面免疫标志物；采用CCK-8法检测不同浓度过氧化氢和褪黑素诱导对大鼠NPMSCs活力的影响确定最佳浓度和实验分组；免疫荧光和流式细胞学技术检测NPMSCs活性氧水平；免疫印迹分析外基质标志蛋白（Ⅱ型胶原、糖胺聚糖）
【基金项目】
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安徽省自然科学重点项目（1908085MC90）； 安徽省教育厅自然科学重点项目（KJ2021A0743）； 蚌埠医学院研究生科研创新计划（Byycx20029）;蚌埠医学院大学生创新创业训练计划（bydc2021017）；
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目的 探讨褪黑素对氧化应激条件下的大鼠髓核间充质干细胞（NPMSCs）的影响及调节机制。方法 使用差速贴壁法获取大鼠NPMSCs。显微镜下观察细胞状态，鉴定第三代细胞三系分化潜能和细胞表面免疫标志物；采用CCK-8法检测不同浓度过氧化氢和褪黑素诱导对大鼠NPMSCs活力的影响确定最佳浓度和实验分组；免疫荧光和流式细胞学技术检测NPMSCs活性氧水平；免疫印迹分析外基质标志蛋白（Ⅱ型胶原、糖胺聚糖）和通路核心蛋白（Nrf2、HO-1）表达情况。结果 褪黑素在氧化应激下保护了NPMSCs的活性，且1μmol/L浓度保护效应最为明显（0.717±0.018,t=7.102,P＜0.01）。褪黑素可抑制NPMSCs在H2O2诱导后的活性氧水平（阳性率70.0%vs. 32.7%）。此外，褪黑素还能显著提高Nrf2/ARE信号通路中关键蛋白核因子E2相关因子（1.925±0.024,t=13.150,P＜0.01）和血红素氧合酶-1（1.605±0.019,t=12.940,P＜0.01）的活性，改善NPMSCs的功能。褪黑素治疗后，细胞基质蛋白Ⅱ型胶原（0.850±0.010,t=25.200,P＜0.01）和糖胺聚糖（0.335±0.013,t=10.640,P＜0.01）表达增加。结论 褪黑素通过调控Nrf2/ARE信号通路可以影响NPMSCs退变的生物学特性。
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