【摘 要】
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目的:构建闭联异松树脂醇二脂脱氢酶(SDH)全基因片段与原核表达质粒载体,在大肠杆菌中进行表达。方法:将SDH3′端和5′端序列通过PCR方法拼接获得全基因后,然后将其插入到相应的
【基金项目】
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浙江省医药卫生科学研究基金项目(2006A093),浙江省自然科学基金项目(243Y206757),浙江省教育厅科研计划项目(20060727)资助
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目的:构建闭联异松树脂醇二脂脱氢酶(SDH)全基因片段与原核表达质粒载体,在大肠杆菌中进行表达。方法:将SDH3′端和5′端序列通过PCR方法拼接获得全基因后,然后将其插入到相应的原核表达质粒载体PGEX-6p-1中,形成了重组载体,并使其在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导其表达蛋白,再用SDS-PAGE电泳检测表达结果。结果:成功的将SDH基因片段拼接成全基因,并将其构建入原核表达载体PGEX-6p-1中。测序结果表明载体构建成功,无插入和移码突变。经1.5mmol/LIPTG诱导后获得与预测大小(29
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