【摘 要】
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目的:探讨葱白提取物对过氧化氢(H2O2)处理脑微血管内皮细胞活性、凋亡、氧化应激的影响及其可能作用机制。方法:体外培养大鼠RBMEC,H2O2处理大鼠脑微血管内皮细胞(RBMEC)建立细胞损伤模型,加入不同剂量的葱白提取物处理细胞,分别将pc DNA、pc DNA-CAI2转染至RBMEC,加入葱白提取物与H2O2共同处理细胞;采用甲基噻唑基四唑(MTT)法、流式细胞术分别检测细胞活性及凋亡率;
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目的:探讨葱白提取物对过氧化氢(H2O2)处理脑微血管内皮细胞活性、凋亡、氧化应激的影响及其可能作用机制。方法:体外培养大鼠RBMEC,H2O2处理大鼠脑微血管内皮细胞(RBMEC)建立细胞损伤模型,加入不同剂量的葱白提取物处理细胞,分别将pc DNA、pc DNA-CAI2转染至RBMEC,加入葱白提取物与H2O2共同处理细胞;采用甲基噻唑基四唑(MTT)法、流式细胞术分别检测细胞活性及凋亡率;采用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)法检测长链非编码RNA CAI2 (Lnc RNA CAI2)的表达量;采用2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)的活性;采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)的活性;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测Cleaved-caspase3、Bax、Pro-caspase3、Bcl-2蛋白表达量。结果:与Con组比较,H2O2处理后可明显降低细胞活性、SOD的活性及Pro-caspase3、Bcl-2蛋白水平(P<0.05),提高CAI2的表达水平、凋亡率、LDH的活性及Cleaved-caspase3、Bax蛋白水平(P<0.05),葱白提取物可明显逆转H2O2对RBMEC活性、凋亡率、氧化应激及CAI2表达量的作用;与H2O2+葱白-高+pc DNA组比较,H2O2+葱白-高+pc DNA-CAI2组细胞活性、SOD的活性及Pro-caspase3、Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05),凋亡率、LDH的活性及Cleaved-caspase3、Bax蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论:葱白提取物可通过抑制CAI2的表达而增强H2O2诱导的RBMEC活性及抑制细胞凋亡、氧化应激,进而对RBMEC细胞损伤发挥保护作用。
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