【摘 要】
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目的 研究微小RNA-27a-3p(miR-27a-3p)对白细胞介素-22(IL-22)诱导的人表皮角质形成细胞损伤的影响.方法 取人表皮角质形成细胞NHEK细胞并随机分为对照组,模型组,miR-NC组和miR-27a-3p mimic组.对照组为正常条件培养的NHEK细胞;模型组用100 ng·mL-1 IL-22处理NHEK细胞24 h;miR-NC组和miR-27a-3p mimic组分别转染阴性对照寡核苷酸和miR-27a-3p模拟物,随后用IL-22处理NHEK细胞24 h.用细胞计数试剂盒-
【机 构】
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河北省中医药科学院 皮肤科,河北 石家庄050000;河北省中医院,皮肤一科,河北 石家庄050011;河北省中医院,皮肤科,河北 石家庄050011;河北省中医院,脾胃科,河北 石家庄050011
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目的 研究微小RNA-27a-3p(miR-27a-3p)对白细胞介素-22(IL-22)诱导的人表皮角质形成细胞损伤的影响.方法 取人表皮角质形成细胞NHEK细胞并随机分为对照组,模型组,miR-NC组和miR-27a-3p mimic组.对照组为正常条件培养的NHEK细胞;模型组用100 ng·mL-1 IL-22处理NHEK细胞24 h;miR-NC组和miR-27a-3p mimic组分别转染阴性对照寡核苷酸和miR-27a-3p模拟物,随后用IL-22处理NHEK细胞24 h.用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测各组光密度并计算细胞存活率,以流式细胞术检测各组细胞凋亡率,以双荧光素酶报告实验验证miR-27a-3p与YAP1靶向关系,以蛋白质印迹法检测白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8),白细胞介素-1β(IL-1β)与Yes相关蛋白1(YAP1)蛋白表达量.结果 对照组、模型组、miR-NC组和miR-27a-3p mimic组48 h时细胞存活率分别为(100.00±0.00)％,(65.96±0.87)％,(67.32±1.26)％,(74.95±0.94)％;72 h时细胞存活率分别(100.00±0.00)％,(62.95±0.75)％,(64.30±1.06)％,(69.90±0.89)％;细胞凋亡率分别为(7.03±0.74)％,(14.13±1.55)％,(13.16±1.65)％,(10.06±1.76)％;以上所有数据,模型组与对照组相比,miR-27a-3p mimic组与miR-NC组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05).此外,双荧光素酶报告实验表明miR-27a-5p可靶向YAP1.结论 miR-27a-3p可抑制IL-22诱导人表皮角质形成细胞NHEK细胞中炎症因子的表达和细胞凋亡,其机制可能与抑制YAP1蛋白表达有关.
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