系统性红斑狼疮女性患者骨髓间充质干细胞衰老与细胞内活性氧的相关性研究

来源 :中华风湿病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:b56240320
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目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者骨髓间充质干细胞(BMSCs)的衰老与细胞内活性氧(ROS)水平的相关性.方法 采用密度梯度离心和贴壁分离法分离培养8例SLE患者及8名健康者BMSCs;免疫荧光法检测细胞核大小;通过检测衰老相关β-半乳糖苷酶(SA β-gal)活性观察BMSCs体外培养过程中的衰老现象;流式细胞术检测BMSCs细胞内活性氧ROS表达水平;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测基因PI3K、NRas、KRas和FoxO3的表达水平;Western blot法检测FoxO3、磷酸化-FoxO3、AKT和磷酸化-AKT的表达水平;采用t检验或Mann-Whitney秩和检验.结果 ①在体外培养过程中,SLE患者和健康人BMSCs的形态和细胞核大小差异无统计学意义[(31±4)与(28±5)μm,P=0.628];②SLE患者BMSCs SA β-gal活性显著高于健康人[(31.8±9.0)%与(12.4±0.7)%,P<0.05];③SLE患者BMSCs细胞内ROS水平高于健康人(34 600±9600与17 958±5400,P<0.05);④SLE患者BMSCs基因PI3K、NRas、KRas和FoxO3在mRNA表达水平与健康人比较差异无统计学意义(P均>0.05);⑤SLE患者BMSCs磷酸化-FoxO3以及磷酸化-AKT表达水平较健康人有所升高.结论 SLE患者BMSCs在体外培养过程中,较健康人容易衰老,细胞内ROS表达水平升高,其机制可能与PI3K/AKT信号通路活化,进而促进FoxO3磷酸化使其活性降低有关。

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