【摘 要】
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本文旨在对牛气管抗菌肽(tracheal antimicrobial peptide,TAP)基因进行原核表达,以及研究重组蛋白的抗菌活性,并分析TAP在各组织的表达分布情况,为开展转TAP基因抗乳腺炎奶牛
【机 构】
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山东省农业科学院奶牛研究中心,宁夏大学农学院动物科学系动物遗传育种与繁殖实验室
【基金项目】
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转基因重大专项重大课题“抗病转基因牛新品种培育”(2008ZX08007-004), 现代农业产业技术体系建设(Nycytx-10), 山东省自然基金(Y2007D10), 山东省中青年科学家基金(2006BS06010)
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本文旨在对牛气管抗菌肽(tracheal antimicrobial peptide,TAP)基因进行原核表达,以及研究重组蛋白的抗菌活性,并分析TAP在各组织的表达分布情况,为开展转TAP基因抗乳腺炎奶牛研究提供技术资料。作者采用RT-PCR从荷斯坦奶牛气管扩增TAP基因,分析其序列后根据大肠杆菌表达系统对密码子的偏好性,人工合成牛TAP基因,构建pET32a(+)-TAP重组质粒;然后转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达并纯化。对表达蛋白进行SDS-PAGE、Western Blot鉴定;在线软件分
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