【摘 要】
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目的建立放射致小鼠骨髓细胞损伤与衰老模型。方法取50只小鼠,随机分为对照组和4.0、6.5、8.5和10.5 Gy不同剂量照射实验组,观察小鼠30 d存活率。另取20只小鼠,分别于6.5 Gy
【机 构】
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重庆医科大学组织胚胎学教研室,重庆医科大学分子诊断中心,重庆医科大学生物医学检验系 临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,
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目的建立放射致小鼠骨髓细胞损伤与衰老模型。方法取50只小鼠,随机分为对照组和4.0、6.5、8.5和10.5 Gy不同剂量照射实验组,观察小鼠30 d存活率。另取20只小鼠,分别于6.5 Gy照射后第1、3、7和30天检测外周血血常规及骨髓单个核细胞(Mononuclear cells,MNCs)数的变化,观察骨髓造血细胞大小及形态并计数集落数量,流式细胞仪检测骨髓MNCs凋亡情况,采用衰老相关的β-半乳糖苷酶(Senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)染色法检测SA-β-gal活性,细胞免疫荧光法分析p16Ink4a蛋白的表达水平。结果小鼠30 d存活率对照组和4.0 Gy实验组均为100%,6.5 Gy实验组为80%,8.5及10.5 Gy实验组均为0。6.5 Gy一次性全身照射后第1、3、7、30 d,小鼠外周血白细胞、血小板、骨髓MNCs数、CFU数量均下降,以照射后第3天最明显,第7天开始恢复正常;照射后骨髓MNCs凋亡率与对照组[(7.32±1.87)%]相比,均明显升高(P<0.05),第3天最高[(35.71±0.30)%],随时间的延长凋亡率逐渐下降;SA-β-gal染色和细胞免疫荧光染色结果显示,照射后阳性细胞率与对照组比较,均明显升高(P<0.05),以第3天最高,随时间延长逐渐降低。结论以6.5 Gy照射,可建立小鼠的骨髓造血细胞损伤与衰老模型,为进一步筛选抗骨髓抑制的药物奠定了基础。
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