双阴性T细胞活化自然杀伤细胞促进小鼠暴发型肝炎的发生发展

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目的

检测双阴性T(double negative T,DNT)细胞对自然杀伤(natural killer,NK)细胞功能的影响,初步探讨其在3型鼠肝炎病毒(murine hepatitis virus strain 3,MHV-3)诱导的小鼠暴发型肝炎(fulminant viral hepatitis,FVH)模型中发挥的作用。

方法

通过腹腔注射MHV-3感染BALB/cJ小鼠诱导FVH,尾静脉转移过继FVH小鼠脾脏DNT细胞,观察小鼠生存时间和肝脏组织病理学改变,流式细胞术检测小鼠肝脏NK细胞CD69表达情况。磁珠分选肝脏DNT细胞和NK细胞,共培养24 h后,检测NK细胞CD69、胞内干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)的表达水平,利用乳酸脱氢酶释放实验检测NK细胞对原代肝细胞的杀伤作用。

结果

转移过继DNT细胞,FVH小鼠生存时间缩短,在三天内全部死亡。转移过继组小鼠肝脏NK细胞CD69表达比例较对照组显著升高[(80.60±5.56)%比(4.53±4.82)%,P<0.05]。肝脏DNT细胞和NK细胞以10∶1比例共培养,NK细胞CD69表达比例较NK单独培养显著增加[(23.1±3.7)%比(4.53±4.82)%,P<0.05],TNF-α表达水平升高[(8.9±2.3)%比(3.0±0.2)%,P<0.05],NK细胞对原代肝细胞的杀伤活性明显增强[(7.6±0.5)%比(3.7±0.4)%,P<0.05]。

结论

DNT细胞可促进NK细胞活化和TNF-α表达,增强NK细胞对肝细胞的杀伤作用,可能为DNT细胞参与FVH发生发展的机制之一。

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