【摘 要】
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纤维素水解成为葡萄糖需要一系列纤维素酶的作用,其中β-葡萄糖苷酶（β-glucosidases）起着至关重要的作用。来自于培菌白蚁中肠的β-葡萄糖苷酶（MbmgBG1）具有较高的葡萄糖耐受性（1
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划)(No.2011CB707402);国家自然科学基金(Nos.31272370,30870085)资助~~
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纤维素水解成为葡萄糖需要一系列纤维素酶的作用,其中β-葡萄糖苷酶（β-glucosidases）起着至关重要的作用。来自于培菌白蚁中肠的β-葡萄糖苷酶（MbmgBG1）具有较高的葡萄糖耐受性（1.5 mol/L的葡萄糖,保持60%以上的酶活力）,但是,酶活力低和热稳定性差限制了β-葡萄糖苷酶（MbmgBG1）在食品以及工业领域中的应用。因此通过对保守氨基酸附近的非保守氨基酸定点突变,获得点突变体（F167L、T176C、E347I、R354K、N393G和V425M）,其中突变体F167L、R354K的比活力（底物pNPG）比MbmgBG1分别高出约2倍和4倍。突变体的Kcat/Km值比野生型大,反映了突变体对底物的亲和力以及催化能力比MbmgBG1强。当酶活力保留60%以上时,MbmgBG1所耐受的葡萄糖浓度为1.5 mol/L,而F167L为2.0 mol/L,R354K为3.0 mol/L。这些特性的增强表明,对活性中心附近保守区域内的非保守氨基酸突变,可以较大程度地影响活性,因此需要更深入地研究β-葡萄糖苷酶的活性中心位点,进行改造以提高催化效率。
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