【摘 要】
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用重组逆转录病毒载体构建能表达反义Ｋｉ－ｒａｓ癌基因ＲＮＡ的重组体，经磷酸钙沉淀法导入病毒包装细胞ＰＡ３１７中。ＲＮＡ杂交分析表明，转化包装细胞系中有重组病毒载体的表达。利用转化包装细胞分泌的病毒上
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用重组逆转录病毒载体构建能表达反义Ｋｉ－ｒａｓ癌基因ＲＮＡ的重组体，经磷酸钙沉淀法导入病毒包装细胞ＰＡ３１７中。ＲＮＡ杂交分析表明，转化包装细胞系中有重组病毒载体的表达。利用转化包装细胞分泌的病毒上清液感染人胰腺癌细胞系ＰＣ－２细胞，经Ｐｕｒｏｍｙｃｉｎ筛选得到稳定的转化细胞系。ＲＮＡ杂交证实转化的胰腺癌细胞中有病毒高度表达，靶基因表达明显减弱。反义Ｋｉ－ｒａｓＲＮＡ使人胰腺癌细胞生长速率下降约６５％。￣３Ｈ胸腺嘧啶掺入、软琼脂集落形成能力以及裸鼠致瘤能力等均显著下降。这一结果表明，反义Ｋｉ－ｒａｓ逆转录病毒载体能有效地抑制靶基因的表达，使胰腺癌细胞恶性表型部分逆转。
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