【摘 要】
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目的 实现食品中5种致病菌的同步增菌,并结合实时荧光聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction, RT-PCR）技术,建立快速检测的方法体系。方法 比较金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌O157:H7、副溶血性弧菌和鼠伤寒沙门氏菌5种目标菌分别在营养肉汤和缓冲蛋白胨水中的生长曲线;优化DNA模板提取的方法;采用实时荧光PCR技术及熔解曲线分
【基金项目】
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浙江省市场监督管理局科技项目（20210150）～～；
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目的 实现食品中5种致病菌的同步增菌,并结合实时荧光聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction, RT-PCR）技术,建立快速检测的方法体系。方法 比较金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌O157:H7、副溶血性弧菌和鼠伤寒沙门氏菌5种目标菌分别在营养肉汤和缓冲蛋白胨水中的生长曲线;优化DNA模板提取的方法;采用实时荧光PCR技术及熔解曲线分析,建立5种致病菌的快速检测方法。结果 缓冲蛋白胨水可以作为5种目标菌的同步增菌液,增菌3h后5种目标菌能被检出,最低检出的DNA浓度范围为10-3～10-4 ng/μL。经熔解曲线分析, 5种目标菌的平均特征熔解温度（Tm）值范围为79.51～87.39℃。结论 本研究建立的5种致病菌快速检测方法,检测总时间大约为6 h,且方法灵敏度和特异性均能满足检测要求。
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