费氏中华根瘤菌腺嘌呤缺陷突变株的构建与筛选

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构建出费氏中华根瘤菌嘌呤合成酶基因purL的基因置换载体pHN701,purL内部Not Ⅰ-Xho Ⅰ片段被luxAB基因取代,造成正常基因的破坏。用该载体对野生型费氏中华根瘤菌HH103进行purL的基因置换,筛选到腺嘌呤缺陷型突变株P825。波动实验和连续转接试验结果表明该突变菌株表型十分稳定。purL表达载体pBBR-PG在P825中可恢复其在基本培养基上的生长情况,证明突变株确实为purL单基因破坏。盆栽结瘤实验结果表明,该突变株只能侵染大豆根系形成不固氮的根瘤。
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