【摘 要】
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目的:构建大鼠糖皮质激素受体变异体表达载体,研究其表达和功能.方法:运用RT- nested PCR扩增糖皮质激素受体不含有编码LBD结构域的cDNA序列,将PCR产物定向克隆至pEGFP-N2质
【机 构】
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第三军医大学新桥医院全军呼吸研究所,兰州军区兰州总医院
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目的:构建大鼠糖皮质激素受体变异体表达载体,研究其表达和功能.方法:运用RT- nested PCR扩增糖皮质激素受体不含有编码LBD结构域的cDNA序列,将PCR产物定向克隆至pEGFP-N2质粒载体,测序筛选重组质粒;荧光显微镜观察重组质粒转染后的表达情况;相对荧光素酶法检测转录激活活性.结果:扩增出长1 612 bp的cDNA序列,测序证实:克隆片段与Genebank该基因序列同源性为100%;重组质粒表达产物定位于细胞核;转染组细胞转录激活活性增强.结论:成功构建糖皮质激素受体变异体的表达载体,该
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