【摘 要】
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在常规方法的基础上,设计了一种适于质谱分析的简化胶内酶解方法。改进的步骤包括:（1）通过加大洗涤所用超纯水量、延长涡混时间来强化凝胶洗涤的环节;（2）加入酸化处理来提高胰蛋
【机 构】
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中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室,中国科学院研究生院
【基金项目】
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国家“863”计划项目(No．2007AA091705);中国科学院重要方向性项目(No．KSCX2-YW-N-013)资助。~~
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在常规方法的基础上,设计了一种适于质谱分析的简化胶内酶解方法。改进的步骤包括:（1）通过加大洗涤所用超纯水量、延长涡混时间来强化凝胶洗涤的环节;（2）加入酸化处理来提高胰蛋白酶的活性;（3）在预酶解时不加CaCl2,减少了酶的自切作用;（4）省略了蛋白质样品脱盐、脱SDS的步骤;（5）直接吸取酶解液进行质谱分析。系统比较该简化酶解法和最新报道的一种酶解方法的质谱鉴定效果,简化法能有效减少酶解后肽段的损失,增加质谱数据库搜索的信息量,得到更可靠的蛋白质鉴定结果。
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