研究血小板α-粒子蛋白包括血小板反应素1(thrombospondin 1, TSP1),血小板因子4(platelet fector 4, PF4), β-血小板球蛋白(β-Thromboglobulin, β-TG)和血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor, PDGF)对巨核细胞生成的影响和可能的作用机制。
方法用血浆凝块巨核细胞集落培养,观察对生长的影响,并进一步使用免疫组化和Western blot证实受体的存在和对c-fos表达的影响。
结果(1)TSP1和PF4显著地抑制巨核细胞集落(CFU-MK)的形成,有意义的起始抑制浓度为2.5 µg/ml(P<0.05)。比较相同浓度的作用TSP1和PF4有相似的抑制效应,但β-TG则无显著的影响。而PDGF显著地刺激巨核细胞的生成,最大的刺激剂量为50 ng/ml;(2)血小板生长因子(TPO)(20 ng/ml)显著地增加CFU-MK的形成,但当加上TSP1(5 μg/ml)时。TPO对巨核细胞的生长作用能被TSP1减弱(71±5.5/2×105细胞~41±8.0/2×105细胞,P < 0.01);(3)证实骨髓的巨核细胞表达TSP受体(CD36)和PDGF受体;(4)使用Western blot方法,发现PDGF能诱导巨核细胞株CHRF-288增加c-fos的表达。
结论证明了血小板α-粒子蛋白TSP1和PF4作为负性调节子,PDGF作为正性调节子,参与巨核细胞生成的反馈调节。TSP1对巨核细胞生长的抑制效应,可能通过结合巨核细胞的TSP受体而起直接作用或通过调节TPO对巨核细胞的结合而起的间接作用。PDGF的生长促进效应,可能是通过结合到巨核细胞上的PDGF受体,激活c-fos基因的表达和有丝分裂的发生。