【摘 要】
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目的研究脾酪氨酸激酶(Syk)在LPS诱导的Toll样受体4(TLR4)信号转导通路的作用。方法用100 ng/mL脂多糖和不同浓度Syk抑制剂分别处理RAW264.7巨噬细胞后,采用Alarmarblue方法
【机 构】
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扬州大学医学院; Helmholtz Center for Infection Research;
【基金项目】
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国家留学基金委-德国亥姆霍兹联合会青年学者交流项目留金出[2007]3021;扬州大学高级人才科研启动基金(2012年)
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目的研究脾酪氨酸激酶(Syk)在LPS诱导的Toll样受体4(TLR4)信号转导通路的作用。方法用100 ng/mL脂多糖和不同浓度Syk抑制剂分别处理RAW264.7巨噬细胞后,采用Alarmarblue方法检测细胞增殖;采用Griess试剂检测细胞培养液中NO的含量;Western blot法检测诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的蛋白表达;ELISA检测巨噬细胞中TNF-α和IL-6含量,RAW-BlueTM巨噬细胞检测核因子κB(NF-κB)和激活子蛋白-1(AP-1)的活化。结果 Syk抑制剂作用于RAW264.7巨噬细胞24 h,(0.5~14.0)μmol/L的Syk抑制剂对细胞增殖无明显影响,但当剂量超过1.5μmol/L时,能显著抑制LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞NO的产生和iNOS的蛋白表达,抑制TNF-α和IL-6的产生(P<0.01)以及NF-κB和AP-1的激活。结论 Syk抑制剂降低LPS诱导的巨噬细胞分泌NO和iNOS的蛋白表达及TNF-α和IL-6的释放,通过下调Syk下游TLR4受体信号传导通路的蛋白,进而显著降低转录因子NF-κB和AP-1的激活有关。
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