肠道病毒71型外壳蛋白VP3在Pichia．pastoris酵母中的表达

来源 :江汉大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：Robert_1967

【摘要】

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利用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）的方法克隆肠道病毒71型SHZH98株外壳蛋白VP3基因，连接T载体，经序列测定后，构建酵母分泌型表达质粒ApPIC9K／VP3，经序列测定证实α-factor号肽和VP3

【作者】

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周世力李琳琳

【机构】

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江汉大学医学与生命科学院,病毒基因工程国家重点实验室

【出处】

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江汉大学学报：自然科学版

【发表日期】

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2006年3期

【关键词】

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肠道病毒71型 VP3 巴斯德毕赤酵母 GS115菌株 Enterovirus71 VP3 Pichia. Pastoris GS115

【基金项目】

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湖北省科技攻关计划（2005AA301C56）

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利用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）的方法克隆肠道病毒71型SHZH98株外壳蛋白VP3基因，连接T载体，经序列测定后，构建酵母分泌型表达质粒ApPIC9K／VP3，经序列测定证实α-factor号肽和VP3的序列和阅读框正确后，用SacI酶切使之线性化，电转化法将目的基因整合到宿主菌GS115基因组上；经转化子表型筛选和PCR分析鉴定后，甲醇诱导，筛选到5株高效表达VP3蛋白的工程菌株．ELISA实验表明：重组蛋白VP3具有较好的免疫原性．

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