【摘 要】
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目的:克隆人釉原蛋白成熟肽编码区基因片断,并构建含有该基因的重组表达质粒.方法:从引产胎儿牙胚组织中抽提总RNA,以Oligo(dt)为引物,逆转录合成牙胚cDNA利用PCR,从cDNA中扩
【机 构】
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上海第二医科大学附属第九人民医院口腔医学院口腔内科,复旦大学
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目的:克隆人釉原蛋白成熟肽编码区基因片断,并构建含有该基因的重组表达质粒.方法:从引产胎儿牙胚组织中抽提总RNA,以Oligo(dt)为引物,逆转录合成牙胚cDNA利用PCR,从cDNA中扩增出人釉原蛋白成熟肽编码序列(约540bp),所得目的基因片断插入表达载体质粒PQE30,转化到大肠杆菌DH5α后挑选阳性克隆,抽提重组质粒DNA,通过PCR、酶切和核苷酸序列分析,鉴定阳性克隆.结果:样品质粒测序证实,质粒PQE30中插入的基因片段与人釉原蛋白成熟肽基因序列完全相同.结论:从人胚胎的牙胚组织中克隆到釉
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