探讨细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)对脂多糖诱导的气道黏液高分泌的抑制作用及其机制。
方法培养人支气管上皮16HBE细胞，根据脂多糖刺激时长将细胞分为0、0.5、1、6、12及24 h组，确定后续实验作用时长。根据不同的转染或处理措施，将细胞分为七组，分别为未转染组、空质粒组、野生型SOCS1组、阴性siRNA组、SOCS1小干扰RNA(SOCS1-siRNA)组、生理缓冲液组和Filgotinib组，再给予脂多糖刺激，以同体积磷酸盐缓冲液处理细胞为对照。酶联免疫吸附(ELISA)法检测以上各组细胞裂解液中黏蛋白5AC(MUC5AC)(μg)相对裂解液总蛋白(mg)的表达量。Western印迹法分别检测细胞裂解液中SOCS1、磷酸化JAK1和STAT1表达量，分别以β-肌动蛋白或总JAK1和STAT1蛋白表达量为内参。
结果脂多糖可诱导MUC5AC蛋白高表达，0、0.5、1、6、12、24 h组MUC5AC的相对表达量分别为(2.86±0.20)、(3.42±0.29)、(3.43±0.12)、(10.22±0.96)、(14.56±1.12)、(14.15±1.34)μg/mg，而SOCS1蛋白则呈反向表达；6 h组MUC5AC蛋白和SOCS1蛋白均处于中间水平，故选择6 h为脂多糖刺激时长。野生型SOCS1组细胞内SOCS1呈过表达状态，并且同Filgotinib组一样，JAK1和STAT1磷酸化水平均显著降低；野生型SOCS1组和Filgotinib组MUC5AC的相对表达量均显著低于未转染组[(4.04±0.65)、(7.02±0.83)比(10.37±1.00)μg/mg] (均P<0.05)。反之，SOCS1-siRNA组细胞内SOCS1表达明显下降，JAK1和STAT1磷酸化水平增强；SOCS1-siRNA组MUC5AC的相对表达量显著高于阴性siRNA组[(13.69±1.32)比(11.01±1.41)μg/mg](P<0.05)。
结论SOCS1可通过对JAK1/STAT1信号通路的负调节作用，抑制脂多糖诱导的MUC5AC高表达。