【摘 要】
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目的:检测大鼠视网膜色素上皮细胞系(RPE-J)是否表达载脂蛋白的基因及其是否具有合成和分泌中性脂质的功能.方法:将RPE-J细胞培养于组织培养板及TransweⅡ上,用RT-PCR检测载
【机 构】
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中山大学中山眼科中心,中山大学眼科学国家重点实验室,广州,510060Department of Ophthalmology,University of Alabama School of Medic
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目的:检测大鼠视网膜色素上皮细胞系(RPE-J)是否表达载脂蛋白的基因及其是否具有合成和分泌中性脂质的功能.方法:将RPE-J细胞培养于组织培养板及TransweⅡ上,用RT-PCR检测载脂蛋白mRNA的表达.将荧光标记颗粒加入细胞中培养以检测细胞吞噬功能.细胞中加入光感受器细胞外节,培养不同时间点后提取脂质,用薄层层析法和酶学荧光法分析细胞中脂质含量及变化.用放射性标记的Oleic Acid([3H]-oleate)检测细胞新合成和分泌中性脂质的功能.结果:RPE-J细胞有载脂蛋白A-Ⅰ,A-Ⅱ,B,E,C-Ⅰ,C-Ⅱ,C-Ⅲ,以及微粒体甘油三酯酸转移蛋白基因的表达.RPE-J细胞具有吞噬功能.吞噬光感受器细胞外节后,RPE-J细胞中甘油三酯含量增加5.8倍,磷脂含量增加2.6倍,非酯化胆固醇增加1.5倍,酯化胆固醇增加0.3倍.RPE-J细胞和培养基内可以检测到新合成的放射标记的中性脂质.细胞内脂质含量随时间延长而增加:培养基中只有磷脂随时间延长而增多.结论:RPE-J细胞有多种载脂蛋白及微粒体甘油三酯酸转移蛋白的基因表达.吞噬光感受器细胞外节后,RPE-J细胞中脂质增加.培养基中加入长链脂肪酸后,RPE-J细胞可以新合成和分泌中性脂质.
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