【摘 要】
：
目的筛选靶向抑制大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)中胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)基因表达最有效的短发夹RNA(shRNA)，为基因沉默IGFBP-3治疗大鼠勃起功能障碍提供依据。方法构建4对靶向IGFBP-3的短发夹RNA(shRNA)质粒和阴性对照，体外原代培养CCSMC，分6组：空白对照组、转染pGPU6/GFP/Neo-IGFBP-3 (611)组、转染pGPU6/GF
【机 构】
：
510080 广州，广东省医学科学院 广东省人民医院泌尿外科,510700 广州，中山大学附属第一医院东院神经内科,510600 广州，中山大学附属第三医院泌尿外科,510080 广州，广东省医学科学
论文部分内容阅读
目的筛选靶向抑制大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)中胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)基因表达最有效的短发夹RNA(shRNA)，为基因沉默IGFBP-3治疗大鼠勃起功能障碍提供依据。
方法构建4对靶向IGFBP-3的短发夹RNA(shRNA)质粒和阴性对照，体外原代培养CCSMC，分6组：空白对照组、转染pGPU6/GFP/Neo-IGFBP-3 (611)组、转染pGPU6/GFP/Neo-shIGFBP-3 (526)组、转染pGPU6/GFP/Neo-shIGFBP-3 (866)组、转染pGPU6/GFP/Neo-shIGFBP-3 (710)组和转染pGPU6/GFP/Neo-shNC阴性对照组；转染48 h后各组分别用实时定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot方法检测靶向沉默IGFBP-3的效果。
结果CCSMC转染后实时定量PCR和Western blot检测发现，pGPU6/GFP/Neo-shIGFBP3-526、pGPU6/GFP/Neo-shIGFBP3-611、pGPU6/GFP/Neo-shIGFBP3-866均有明显的沉默效果，与空白对照组和转染pGPU6/GFP/Neo-shNC组比较差异有统计学意义，而其中pGPU6/GFP/Neo-shIGFBP3-526沉默效果最明显，实时定量PCR和Western blot结果显示分别可以抑制72%和79%。
结论靶向IGFBP-3基因的shRNA能够高效抑制大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞中靶基因的表达，为进一步体内实验奠定基础。
其他文献
军队院校智慧校园建设,还处于初级阶段,需要解决的问题还很多,在之后的建设过程中也将会遇到很多不可预测的难题.根据现今智慧校园建设的实际情况,提出几点建议,供下一步军队
利用TG-DTG-DSC热分析方法对武钢常用烟煤、无烟煤的混合燃烧特性进行实验研究,根据实验数据评估了不同种类烟煤、无烟煤混合使用的最佳配比,武钢炼铁厂根据实验结果,将某些
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
目的 探讨缝隙连接抑制剂甘珀酸对实验性蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的治疗作用.方法 建立兔蛛网膜下腔二次出血模型,脑池及静脉分别给与缝隙连接抑制剂甘珀酸,脑血管造影及
提出了一种基于人体部位特征重要性的行人再识别算法,该算法首先提取人体各部位的颜色、纹理以及形状等特征,然后对多个行人样本的每个部位分别进行聚类分析,使用误差积累的方法为每个分类计算一种更适合该分类的部位特征重要性权值向量,使得不同类型特征能更有效地应用在其适合的外观上。在公共数据集VIPeR上进行了实验,通过积累匹配特性(cumulative matching characteristic,CMC
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
目的分析甘肃省成人糖调节受损（IGR）的特点和分布情况。方法选取2013至2014年甘肃省糖尿病流行病学调查项目共31 417人中的20至74岁经口服75 g葡萄糖耐量试验（OGTT）的28 087例为调查对象，分为糖耐量正常（NGT）组、单纯空腹血糖受损（I-IFG）组、单纯糖耐量减低（I-IGT）组以及空腹血糖受损合并糖耐量减低（IFG/IGT）组，按照1999年WHO关于糖尿病诊断标准，比较
目的探讨真皮下血管网皮瓣原位再植治疗手背皮肤逆行撕脱伤的临床效果.方法 1996年1月至2001年6月,应用真皮下血管网皮瓣原位再植治疗手背皮肤逆行撕脱伤56例.撕脱皮瓣面积为
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥