【摘 要】
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目的建立指环病毒(Torque teno virus,TTV)6实时荧光定量PCR检测体系,并验证检测体系的敏感性与特异性。方法根据GenBank中登录的TTV6基因序列设计引物与FAM-Eclipse探针,建立基于FAM-Eclipse探针法的实时荧光定量PCR检测方法,建立标准曲线并进行敏感性与特异性分析。结果建立了能够特异检测TTV6的荧光定量PCR检测方法,标准曲线方程为y=-3.0921
【机 构】
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中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 传染病预防控制国家重点实验室,北京 102206,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 传染病预防控制国家重点实验室,北京 102206,中国疾病预防控制中心病毒
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目的建立指环病毒(Torque teno virus,TTV)6实时荧光定量PCR检测体系,并验证检测体系的敏感性与特异性。
方法根据GenBank中登录的TTV6基因序列设计引物与FAM-Eclipse探针,建立基于FAM-Eclipse探针法的实时荧光定量PCR检测方法,建立标准曲线并进行敏感性与特异性分析。
结果建立了能够特异检测TTV6的荧光定量PCR检测方法,标准曲线方程为y=-3.0921x + 28.36,扩增效率和R2分别为99.6%和1.000。该方法检测TTV6的敏感度为1.0×10拷贝/μl,与其他病毒无交叉反应。在临床呼吸道感染人群56份咽拭子样本中检出1例TTV6阳性。
结论基于FAM-Eclipse探针建立的检测TTV6实时荧光定量PCR检测体系具有特异性强与灵敏度高等优点,可为临床上TTV6的检出与定量病毒含量提供了一种有效的手段。
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