武夷菌素产生菌Fosmid文库的构建及文库探针的获得

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以不吸水链霉菌武夷变种CK-15为材料,提取基因组DNA,经Sau3AI部分酶切后回收35—40kb之间的片段。连接到pCC1FOS载体上,经过包装转染涂布后构建得到了CK-15基因组的Fosmid文库,文库的滴度为8.8×10^5CFU/mL。随机挑取16个阳性克隆,经EcoR I和Hind Ⅲ双酶切电泳分析,样品插入片段平均长度大于35kh,插入率为100%,符合构建文库的要求。根据多氧霉素、尼克霉素生物合成基因及大环内酯类聚酮合成酶基因(PKS)设计特异性引物,以基因组为模板进行PCR扩增
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