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摘 要 青头萝卜市场接受度高，本研究通过传统品种形态学比较及分子标记检测等方法比较了不同地方优良青头萝卜品种。形态学及分子标记分析结果表明：潍县青萝卜、黄州萝卜和苹果味青头萝卜在植物学形状与其他品种有明显差异，南乡萝卜糠心程度较早;SSR分子标记检测下，潍县青萝卜、武青萝卜和苹果味青头萝卜与其他品类存在差异。
关键词 青头萝卜;植物学性状;品种比较;分子标记
中图分类号：S631.1 文献标志码：A DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2021.21.103
青头萝卜适应性强、耐贮运，具有良好的商品性，是广大种植户的主栽品种。青头萝卜肉质紧密、脆甜多汁，有清热解毒、助消化等医疗保健功能[1]。为筛选长势更优、产量更高、营养更好的青头萝卜品种，结合形态学及分子标记分析，开展针对黄州萝卜、潍县青萝卜等系列地方优秀青头萝卜品种比较试验，以期为广大种植户和育种材料筛选提供参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料
参试萝卜品种为吴家山青头萝卜、潍县青萝卜、九头青萝卜、河南青头萝卜、甘肃青头萝卜、黄州萝卜、自由青头萝卜、苹果味青头萝卜、武青萝卜和南乡萝卜，各品种种子来自黄冈师范学院大别山生物资源库和黄州萝卜研究中心，2020年9月采用常规方法种植于黄冈市农科院梅家墩实验基地。
1.2 试验方法
试验地块土壤为砂壤土，前茬为萝卜，小区试验面积为21.6 m2，筑深沟高洼，穴播。每个萝卜品种3次重复，随机区组排列[2]。
待成熟后采收萝卜，利用Imge-J软件V 1.4进行植物学性状测定，利用SPSS 15进行相关性状方差分析。
提取萝卜样品DNA，通过1%琼脂糖电泳检测DNA质量，之后利用PCR扩增目的基因，PCR反应体系包括：12.5 μL 2×Taq PCR MasterMix，0.5 μL DNA，1 μL 10 μmol·L-1引物，10 μL双蒸水。扩增程序为：94 ℃预变性3 min;94 ℃变性30 s，56 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，35个循环;72 ℃终延伸5 min，4 ℃保存，PCR扩增产物使用1%琼脂糖凝胶电泳分离。分子标记引物序列如表1[3-4]。
2 结果与分析
2.1 各参试青头萝卜品种植物学性状比较
传统萝卜肉质根为主要食用部分，故其商品性主要体现在根部。通过观察比较各参试青头萝卜品种的生长发育过程，对青头萝卜品种的根、叶等重要植物学性状进行统计，并重点分析根部性状，统计结果如表2。
由表2可知：单根长最长的是苹果味青头萝卜长（25.67 cm），南乡萝卜的单根长最短（5.47 cm），差异显著;单根宽最宽的是南乡萝卜（7.60 cm），潍县青萝卜的单根宽最短（4.43 cm），差异显著;单根最重的是九头青萝卜（0.48 kg），潍县青萝卜的单根重最轻
（0.13 kg），差异显著;甘肃青头萝卜叶片数最少（10片），叶片数最大的是黄州萝卜（17片），差异显著;展开度最大的是黄州萝卜（72.33 cm），河南青头萝卜的叶片展开度最短（47.67 cm），差异显著;吴家山青头萝卜露地高度为0 cm，苹果味青头萝卜露地高度为14.67 cm，差异显著;潍县青萝卜的株高最低（18.97 cm），单株株高最高的是黄州萝卜（36.83 cm），差异显著;叶片长度最长的是武青萝卜（45.93 cm），九头青的叶片长度最短（27.00 cm），差异显著。
2.2 青头萝卜肉质根解剖形态比较
青头萝卜肉质根是体现其商品性关键结构。图1显示了青头萝卜各品种的肉质根形态及肉质根横切面结构，可以看到肉色和肉质根皮色较为一致，肉质根皮青色分布较广且较深时肉质根内部颜色也都更表现为青色，如潍县青萝卜及苹果味青头萝卜肉质根内外都充满青色且分布较多。除此之外，发现肉质根空心（糠心）程度差异明显，相同生长周期条件下，南乡萝卜较早出现肉质根空心情况。
A～J分别为甘肃青头萝卜、武青萝卜、黄州萝卜、潍县青萝卜、苹果味青头萝卜、自由青头萝卜、河南青头萝卜、吴家山青头萝卜、南乡萝卜、九头青萝卜的肉质根;A1～J1分别为上述萝卜肉质根横切面。
2.3 分子标记在青头萝卜间的差异分布
萝卜形态差异同遗传物质特别是分子标记的差异分布密切相关。由图2可知，萝卜SSR分子标记R101在武青萝卜没有扩增出条带，与其他9个样品存在差异;SSR分子标记R102在潍县青萝卜和苹果味青头萝卜中没有扩增出条带，与其他8个样品存在差异;SSR分子标记R103在武青萝卜中也没有扩增出条带，与其他9个样品存在差异。
基于R101、R102和R103三种SSR分子标记的扩增条带比较结果，发现武青萝卜、潍县青萝卜和苹果味青头萝卜同本实验中的其他类型萝卜遗传关系较远或差异更大，相对而言，南乡萝卜、自由青头萝卜、黄州萝卜、甘肃青头萝卜、河南青头萝卜、九头青萝卜和吴家山青头萝卜遗传关系较近。
1～11分别为南乡萝卜、武青萝卜、苹果味青头萝卜、自由青头萝卜、黄州萝卜、甘肃青头萝卜、河南青头萝卜、九头青萝卜、潍县青萝卜、吴家山青头萝卜和Marker。
3 结论
通过对各参试青头萝卜品种的植物学形态特征和分子标记等进行连续观察和比较分析，结果表明南乡萝卜单根最宽且长度最短，相同生长周期条件下较早出现糠心;潍县青萝卜根长、单根重和株高均为最低;黄州萝卜的叶片展开度、叶片数量和株高都是最高，但露地高最低。武青萝卜在分子标记R101和R103中均未能扩增出条带，表明武青萝卜明显不同于其他类型青头萝卜;潍县青萝卜和苹果味青头萝卜在R102分子标记中均无法扩增出条带，表明潍县青萝卜和苹果味青头萝卜比较接近，符合两者肉质根形态特征的一致性，另外该两类萝卜也明顯不同于其他萝卜。
通过植物学性状比较及分子标记分析后，上述结果可为广大萝卜种植用户选择青头萝卜品种提供参考依据。结合前人研究结果[5-6]，本研究对青头萝卜进行系统形态比较及分子标记检测，可更有针对性利用与开发青头萝卜类型的地方优秀萝卜品种。
参考文献：
[1] 郑思宇，范伟强，王超楠，等.青萝卜种质资源主要农艺性状的表型评价[J].中国蔬菜，2020（9）：50-56.
[2] 徐建波，张晓康，李德超，等.夏秋萝卜品种比较试验[J].上海蔬菜，2015（3）：19-20.
[3] 李世升，张娜娜，陈亚珠，等.基于SSR分子标记的萝卜遗传多样性研究[J].黑龙江农业科学，2019（2）：6-9.
[4] 李竟才，李世升，张娜娜，等.白萝卜纯度鉴定的SSR分子标记筛选与鉴定[J].分子植物育种，2018，16（8）：2525-2532.
[5] 张小康，朱运峰，陈玉霞，等.SSR分子标记技术在汉青一号萝卜种子纯度鉴定中的应用[J].湖北农业科学，2016，55（19）：5069-5071.
[6] 王超楠，黄志银，李梅，等.SSR标记技术在“七星”青萝卜杂交种纯度鉴定中的应用[J].种子，2019，38（3）：132-134.
（责任编辑：赵中正）
关键词 青头萝卜;植物学性状;品种比较;分子标记
中图分类号：S631.1 文献标志码：A DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2021.21.103
青头萝卜适应性强、耐贮运，具有良好的商品性，是广大种植户的主栽品种。青头萝卜肉质紧密、脆甜多汁，有清热解毒、助消化等医疗保健功能[1]。为筛选长势更优、产量更高、营养更好的青头萝卜品种，结合形态学及分子标记分析，开展针对黄州萝卜、潍县青萝卜等系列地方优秀青头萝卜品种比较试验，以期为广大种植户和育种材料筛选提供参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料
参试萝卜品种为吴家山青头萝卜、潍县青萝卜、九头青萝卜、河南青头萝卜、甘肃青头萝卜、黄州萝卜、自由青头萝卜、苹果味青头萝卜、武青萝卜和南乡萝卜，各品种种子来自黄冈师范学院大别山生物资源库和黄州萝卜研究中心，2020年9月采用常规方法种植于黄冈市农科院梅家墩实验基地。
1.2 试验方法
试验地块土壤为砂壤土，前茬为萝卜，小区试验面积为21.6 m2，筑深沟高洼，穴播。每个萝卜品种3次重复，随机区组排列[2]。
待成熟后采收萝卜，利用Imge-J软件V 1.4进行植物学性状测定，利用SPSS 15进行相关性状方差分析。
提取萝卜样品DNA，通过1%琼脂糖电泳检测DNA质量，之后利用PCR扩增目的基因，PCR反应体系包括：12.5 μL 2×Taq PCR MasterMix，0.5 μL DNA，1 μL 10 μmol·L-1引物，10 μL双蒸水。扩增程序为：94 ℃预变性3 min;94 ℃变性30 s，56 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，35个循环;72 ℃终延伸5 min，4 ℃保存，PCR扩增产物使用1%琼脂糖凝胶电泳分离。分子标记引物序列如表1[3-4]。
2 结果与分析
2.1 各参试青头萝卜品种植物学性状比较
传统萝卜肉质根为主要食用部分，故其商品性主要体现在根部。通过观察比较各参试青头萝卜品种的生长发育过程，对青头萝卜品种的根、叶等重要植物学性状进行统计，并重点分析根部性状，统计结果如表2。
由表2可知：单根长最长的是苹果味青头萝卜长（25.67 cm），南乡萝卜的单根长最短（5.47 cm），差异显著;单根宽最宽的是南乡萝卜（7.60 cm），潍县青萝卜的单根宽最短（4.43 cm），差异显著;单根最重的是九头青萝卜（0.48 kg），潍县青萝卜的单根重最轻
（0.13 kg），差异显著;甘肃青头萝卜叶片数最少（10片），叶片数最大的是黄州萝卜（17片），差异显著;展开度最大的是黄州萝卜（72.33 cm），河南青头萝卜的叶片展开度最短（47.67 cm），差异显著;吴家山青头萝卜露地高度为0 cm，苹果味青头萝卜露地高度为14.67 cm，差异显著;潍县青萝卜的株高最低（18.97 cm），单株株高最高的是黄州萝卜（36.83 cm），差异显著;叶片长度最长的是武青萝卜（45.93 cm），九头青的叶片长度最短（27.00 cm），差异显著。
2.2 青头萝卜肉质根解剖形态比较
青头萝卜肉质根是体现其商品性关键结构。图1显示了青头萝卜各品种的肉质根形态及肉质根横切面结构，可以看到肉色和肉质根皮色较为一致，肉质根皮青色分布较广且较深时肉质根内部颜色也都更表现为青色，如潍县青萝卜及苹果味青头萝卜肉质根内外都充满青色且分布较多。除此之外，发现肉质根空心（糠心）程度差异明显，相同生长周期条件下，南乡萝卜较早出现肉质根空心情况。
A～J分别为甘肃青头萝卜、武青萝卜、黄州萝卜、潍县青萝卜、苹果味青头萝卜、自由青头萝卜、河南青头萝卜、吴家山青头萝卜、南乡萝卜、九头青萝卜的肉质根;A1～J1分别为上述萝卜肉质根横切面。
2.3 分子标记在青头萝卜间的差异分布
萝卜形态差异同遗传物质特别是分子标记的差异分布密切相关。由图2可知，萝卜SSR分子标记R101在武青萝卜没有扩增出条带，与其他9个样品存在差异;SSR分子标记R102在潍县青萝卜和苹果味青头萝卜中没有扩增出条带，与其他8个样品存在差异;SSR分子标记R103在武青萝卜中也没有扩增出条带，与其他9个样品存在差异。
基于R101、R102和R103三种SSR分子标记的扩增条带比较结果，发现武青萝卜、潍县青萝卜和苹果味青头萝卜同本实验中的其他类型萝卜遗传关系较远或差异更大，相对而言，南乡萝卜、自由青头萝卜、黄州萝卜、甘肃青头萝卜、河南青头萝卜、九头青萝卜和吴家山青头萝卜遗传关系较近。
1～11分别为南乡萝卜、武青萝卜、苹果味青头萝卜、自由青头萝卜、黄州萝卜、甘肃青头萝卜、河南青头萝卜、九头青萝卜、潍县青萝卜、吴家山青头萝卜和Marker。
3 结论
通过对各参试青头萝卜品种的植物学形态特征和分子标记等进行连续观察和比较分析，结果表明南乡萝卜单根最宽且长度最短，相同生长周期条件下较早出现糠心;潍县青萝卜根长、单根重和株高均为最低;黄州萝卜的叶片展开度、叶片数量和株高都是最高，但露地高最低。武青萝卜在分子标记R101和R103中均未能扩增出条带，表明武青萝卜明显不同于其他类型青头萝卜;潍县青萝卜和苹果味青头萝卜在R102分子标记中均无法扩增出条带，表明潍县青萝卜和苹果味青头萝卜比较接近，符合两者肉质根形态特征的一致性，另外该两类萝卜也明顯不同于其他萝卜。
通过植物学性状比较及分子标记分析后，上述结果可为广大萝卜种植用户选择青头萝卜品种提供参考依据。结合前人研究结果[5-6]，本研究对青头萝卜进行系统形态比较及分子标记检测，可更有针对性利用与开发青头萝卜类型的地方优秀萝卜品种。
参考文献：
[1] 郑思宇，范伟强，王超楠，等.青萝卜种质资源主要农艺性状的表型评价[J].中国蔬菜，2020（9）：50-56.
[2] 徐建波，张晓康，李德超，等.夏秋萝卜品种比较试验[J].上海蔬菜，2015（3）：19-20.
[3] 李世升，张娜娜，陈亚珠，等.基于SSR分子标记的萝卜遗传多样性研究[J].黑龙江农业科学，2019（2）：6-9.
[4] 李竟才，李世升，张娜娜，等.白萝卜纯度鉴定的SSR分子标记筛选与鉴定[J].分子植物育种，2018，16（8）：2525-2532.
[5] 张小康，朱运峰，陈玉霞，等.SSR分子标记技术在汉青一号萝卜种子纯度鉴定中的应用[J].湖北农业科学，2016，55（19）：5069-5071.
[6] 王超楠，黄志银，李梅，等.SSR标记技术在“七星”青萝卜杂交种纯度鉴定中的应用[J].种子，2019，38（3）：132-134.
（责任编辑：赵中正）