【摘 要】
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目的：克隆大鼠原癌基因pim-3并构建真核表达重组质粒pEGFP—N2／pim-3，观察他在真核细胞SMMC-7721中的表达情况以及对细胞凋亡的影响．方法：利用TRIzol从液氮保存的大鼠骨骼肌组织中
【机 构】
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南昌大学第二附属医院消化内科江西省分子医学重点实验室,江西省分子医学重点实验室
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目的：克隆大鼠原癌基因pim-3并构建真核表达重组质粒pEGFP—N2／pim-3，观察他在真核细胞SMMC-7721中的表达情况以及对细胞凋亡的影响．方法：利用TRIzol从液氮保存的大鼠骨骼肌组织中提取总RNA，采用RT—PCR方法获取pim-3cDNA，并构建重组质粒pEGFP-N2／pim-3，转化用CaCl2法制备的大肠杆菌JM-109菌株，酶切以及测序鉴定．将重组质粒通过脂质体介导转染肝癌SMMC-7721细胞后利用倒置荧光显微镜观察基因表达情况，并利用流式细胞术及MTT比色实验对转染细胞的生
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