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目的
观察去细胞支架介导内皮祖细胞归巢大鼠半肾再生的可行性,为细胞移植治疗中去细胞支架材料的应用提供理论依据。
方法2014年9月至2015年4月,采用密度梯度离心法分离,体外诱导培养大鼠骨髓单个核细胞;用Triton X-100和SDS联合灌注法制备大鼠双肾去细胞支架;实验组大鼠予左侧半肾切除后缝合支架,对照组予半肾切除后切缘缝合,术后将体外扩增培养的EPCs进行CM-Dil标记后注入大鼠模型内。观察EPCs在大鼠体内各主要脏器的分布,比较两组不同处理对EPCs归巢的作用。
结果在体外诱导培养10 d的EPCs可共吞噬表达Dil-acLDL与FITC-UEA-1,能有效的被CM-Dil标记;经过灌注法制备的双肾去细胞支架经HE染色后无明显细胞核残留,且细胞外基质连续,DNA残留量为(4.9±0.57)μg/g;经标记后的EPCs移植到模型体内后,残留的半肾、支架部位及脾脏中均发现大量标记细胞,且实验组残留半肾中标记的EPCs数量(28.8±3.5)明显比对照组多(1.2±0.8)(P<0.05)。
结论去细胞支架介导EPCs移植可有效促进EPCs归巢,为研究干和(或)祖细胞移植治疗组织器官修复再生提供了一个新的研究方法。