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以二乙基膦酸乙酸作为通用结构半抗原，经活化酯法（NHS—DCC）、碳化二亚胺法（EDC）和混合酸酐法（MAH）合成了3种免疫原，用MAH法合成了1种包被原。人工抗原用紫外分光光度法初步鉴定偶联结果并计算克分子浓度分别为2．846×10-3、2．133×10-3、3．574×10-3、2．584×10-3。后用核磁共振P谱进一步确定偶联情况。偶联成功后免疫Balb／c小鼠制备多克隆抗体，动物实验检测人工抗原的免疫原性，结果表明：NHS—DCC、EDC和MAH法所制得抗