【摘 要】
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构建了重组逆转录病毒表达质粒plxas-N,该质粒能表达互补猪传染性胃肠炎病毒N基因全长的反义RNA序列.用质脂体方法将重组质粒plxas-N转染至PA317细胞中,经抗生素G418(500μg/
【基金项目】
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致谢：试验是2004年完成于东北农业大学动物医学院预防兽医系,在此感谢李一经教授的悉心指导.
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构建了重组逆转录病毒表达质粒plxas-N,该质粒能表达互补猪传染性胃肠炎病毒N基因全长的反义RNA序列.用质脂体方法将重组质粒plxas-N转染至PA317细胞中,经抗生素G418(500μg/ml)筛选出稳定的产毒细胞克隆.分别扩大培养细胞克隆,取其上清液感染小鼠成纤维细胞NIH3T3,测定细胞克隆产生的重组病毒滴度,并用高滴度重组病毒感染IBRS2细胞.提取被感染的IBRS2细胞的总RNA,RT-PCR证明p]xas-N整合到IBRS2细胞基因组.通过TGEV分别感染IBRS2和IBRS2抗性细胞产
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