人前列腺特异性膜抗原胞外区基因重组腺病毒的构建

来源 :武汉大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:pittashen
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:体外构建和表达人前列腺特异性膜抗原胞外区(tPSMA)基因重组腺病毒。方法:首先设计一对含BglⅡ和HindⅢ酶切位点的tPSMA引物,以质粒pCR3.1-Uni-hPSMA为模板,通过PCR扩增tPSMA并克隆到腺病毒穿梭质粒中,获得pAdTrack-CMV-tPSMA质粒,将其与含有pAdeasy-1的BJ5183菌电转化,筛选阳性克隆,重组子经线性化后转染HEK293细胞,通过观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达、RT-PCR、Western blot法检测目的基因tPSMA的表达。结果:成功构建了含tPSMA的重组腺病毒载体Ad-tPSMA,病毒滴度为2.0×1011pfu/L。结论:该重组腺病毒的构建为下一步研究用其制备树突状细胞疫苗基因治疗提供基础。 Objective: To construct and express the recombinant adenovirus of extracellular domain of human prostate specific membrane antigen (tPSMA) in vitro. Methods: A pair of tPSMA primer containing Bgl Ⅱ and Hind Ⅲ restriction sites was designed. Plasmid pCR3.1-Uni-hPSMA was used as a template to amplify tPSMA by PCR and cloned into adenovirus shuttle plasmid to obtain pAdTrack-CMV-tPSMA The recombinant plasmid was transformed into HEK293 cells by linearization and then transfected into HEK293 cells. The expression of green fluorescent protein (GFP) was observed by RT-PCR and Western blot. Gene tPSMA expression. Results: The recombinant adenovirus Ad-tPSMA containing tPSMA was successfully constructed and its titer was 2.0 × 10 11 pfu / L. Conclusion: The construction of the recombinant adenovirus provides the foundation for the further study of gene therapy of dendritic cell vaccine.
其他文献
安徽省男科学研究会经安徽省科委及科协的审查,报请安徽省民政厅批准,于1993年11月8~9日在合肥成立。 男科学是一门新兴学科,内容多,涉及面广。生殖与人类的生存、繁衍密切相
为进一步加强工会经费的审查监督,各级工会必须认真贯彻落实中国工会十四大精神和全总的工作部署,必须围绕建立健全工会经费审查监督工作体系这个目标,健全工会经审制度和检
初中是学习基础文化知识的黄金时期,而英语的学习基础是非常重要的。作为一门语言学科,其学习的作用是提高学生的英语运用能力,掌握并可以熟练地运用这门语言。而阅读对于语
当前医院分级管理工作已全面展开,医院统计部门担负着十分艰巨的统计资料准备工作。为了适应这一任务,很好地配合医院评审,中国卫生统计学会与贵州省卫生统计学会于7月9日在
《云南电业》自1999年初开设“两改一同价”专栏以来,积极宣传农电体制改革和农村电网建设改造的理论探讨和经验总结,较好地促进了全省农电的健康发展。为加大农电工作的宣
期刊
芍药中主要成分丹皮酚具有镇痛、抗炎、抗菌等作用,苯甲酸被认为是有害成分。我们应用薄层扫描法对不同产地、不同种类的芍药中丹皮酚及苯甲酸含量进行了测定,结果较满意,报告如
蜂胶是密蜂采集植物上的树脂并混入其上跨腺分泌物,通过酶的作用,脂类就成了有价值的物质——蜂胶。它具有显著的抗菌、防腐、消炎、增进机体免疫功能及促进组织再生等作用”“
在深化改革、开放搞活、市场经济大潮的推动下,各领域和各系统无时无刻不在发生着巨大的变化。卫生防疫这个关系到亿万人民群众健康和社会主义事业兴旺发达的领域,无论在社
病案管理是一项科学性、技术性较强的工作,必须采取一系列科学方法进行管理.以满足医疗、教学、科研的需要。我院于1992年扩建以来。单设了病案统计室,病案管理工作建立了一
目前,我国医疗改革正处在进一步深化发展的阶段。要不要将医疗服务完全市场化,这是影响医疗改革发展的关键。国家卫生部负责人认为:医疗服务不能实行市场体制。这位负责人认