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为了建立大肠杆菌O157:H7菌体蛋白的双向电泳技术,获得背景清晰,蛋白点分辨率高,重复性好的双向电泳图谱。对双向电泳技术中的样品制备方法、上样量、染色等关键步骤进行了优化。最终选用冰浴超声(9s/间隔9s,200w)3min,再置4℃24h后离心提取蛋白样品,以上样量为0.5mg菌体蛋白在pH值4—7的24cmIPG胶条上进行电泳,最后用考马斯亮蓝G-250染色,获得了较好的双向电泳图谱,得到了850±20个蛋白质点,蛋白主要集中在pH值4.06—7.53之间,匹配率为95.3%。随机选取10